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          如何提高腫瘤細胞培養(yǎng)存活率和生長率?

          發(fā)布時間: 2022-10-20  點擊次數(shù): 1089次

          原理

          根據(jù)人們的經(jīng)驗,腫瘤細胞在體外不易培養(yǎng),建立能傳代的腫瘤細胞系更為困難。

          當腫瘤組織或細胞初代接種培養(yǎng)后,常出現(xiàn)以下幾種情況:


          1.  *無細胞游出或移動;

          2.  有細胞移動和游出,但無細胞增殖,細胞長時間處于停滯狀態(tài)以致難以傳代;

          3.  有細胞增殖,傳若干代后停止生長或衰退死亡;

          4.  傳數(shù)代后細胞增殖緩慢,經(jīng)過一段停滯期后,才又呈旺盛生長狀態(tài),形成穩(wěn)定生長的腫瘤傳代細胞系。

          以上現(xiàn)象說明腫瘤細胞對體外生存條件有較高的要求,并需經(jīng)過對新環(huán)境的適應才能生長,因此欲獲得好的培養(yǎng)效果,不能局限于一般培養(yǎng)法,必須采用一些特殊的措施。


          材料與儀器

          瘤組織
          Hanks
          棉球

          步驟

          一、適宜底物


          如:把經(jīng)過純化的細胞接種在不同的底物上,如鼠尾膠原底層、飼細胞層等。

          二、生長因子

          應用促細胞生長因子,向培養(yǎng)液中增加一種或幾種促細胞生長因子。根據(jù)細胞種類不同選用不同的促生長物,常用有胰島素、氫化可的松、雌激素以及其它生長因子。

          三、動物體媒介培養(yǎng)

          為提高腫瘤細胞對體外培養(yǎng)環(huán)境的適應力和增加有活力癌細胞(干細胞)的數(shù)量,可采用動物體轉(zhuǎn)嫁接種成瘤后,再從動物體內(nèi)取出進行培養(yǎng),能提高體外培養(yǎng)的成功率。受體動物以裸鼠最好。

          1.  瘤塊接種

          取新鮮瘤組織,用Hanks液洗凈血污,切成1~3 毫米小塊,用穿刺針頭吸一小瘤塊,用酒精棉球擦拭動物腋部后,直接刺入皮下,注入瘤塊。

          2.  飼養(yǎng)觀察,待腫瘤生長達較大體積后,剝?nèi)〕隽鼋M織。

          3.  進行體外培養(yǎng)。

          4.  為防止失敗,仍取部分瘤組織繼續(xù)在裸鼠體內(nèi)傳代。通過裸鼠媒介接種,有活力的腫瘤細胞數(shù)量增多,細胞培養(yǎng)易于成功。
           
          腫瘤細胞培養(yǎng)方法與培養(yǎng)正常細胞*相同,但成功率比正常細胞高。


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