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          染料攝取法測(cè)定細(xì)胞生存力實(shí)驗(yàn)

          發(fā)布時(shí)間: 2022-12-13  點(diǎn)擊次數(shù): 942次

          原理

          細(xì)胞懸液用碘化丙啶和二乙酰熒光素的混合液染色,用熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀檢測(cè)。

          材料與儀器


          步驟


          材料

          無菌

          單細(xì)胞懸液
          雙醋酸熒光素,10ug/ml,溶于 HBSS
          碘化丙啶,500ug/ml

          非滅菌

          熒光顯微鏡
          濾光片
          熒光素:激發(fā) 450/590 nm ,發(fā)射 LP 515 nm
          碘化丙啶:激發(fā) 488nm ,發(fā)射 615 nm

          操作步驟

          1. 細(xì)胞懸液的制備與染料排斥法相同(見方案 22.1),但是生長(zhǎng)液中不含酚紅。
          2. 以 1 : 10 的比例加入熒光素染料混合液,二乙酰熒光素的終濃度為 l ug/ml,碘化丙啶的終濃度為 50ug/ml。 :
          3. 將細(xì)胞置于 37°C , 溫育 10 min。
          4. 將一滴細(xì)胞滴在載玻片上,蓋上蓋玻片,用熒光顯微鏡觀察。


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